Получение рекомбинантного инсулина

Слайд 1

Департамент образования , науки и молодежной политике Воронежской области Государственное бюджетное образовательное учреждение Воронежской области << Лискинский аграрно-технологический техникум >> Получение рекомбинантного инсулина. Выполнил студент очного отделения 2 курса Группы 3-2 Швалев Д . Л . Проверила : преподаватель Волкова Е . В .

Слайд 2

Инсулин Инсулин-белковый (пептидный) гормон животных и человека, вырабатываемый клетками островков Лангерганса поджелудочной железы в виде предшественника - препроинсулина , состоящего из 109 аминокислотных остатков

Слайд 3

Значение инсулина Инсулин понижает содержание сахара в крови, задерживая распад гликогена в печени и увеличивая использование глюкозы мышечными и другими клетками. Недостаток инсулина приводит к развитию такого заболевания, как сахарный диабет.

Слайд 4

Первичная структура инсулина Первичная структура инсулина у разных биологических видов несколько различается, как различается и его важность в регуляции обмена углеводов. Наиболее близким к человеческому является инсулин свиньи, который различается с ним всего одним аминокислотным остатком: в 30 положении B-цепи свиного инсулина расположен аланин , а в инсулине человека — треонин

Слайд 5

Превращение инсулина свиньи в инсулин человека В 1972 г. был разработан метод превращения инсулина свиньи в инсулин человека ферментативным замещением остатка аланина на остаток треонина . В результате был получен однокомпонентный инсулин человека 99 % чистоты . Ограничения использования этого метода связаны с ограниченностью сырьевой базы - поджелудочной железы телят и свиней, поскольку для получения 100 г кристаллического инсулина требуется 800-1000 кг исходного сырья .

Слайд 6

История развития В 1980 г. У.Гилберт с сотрудниками выделили мРНК инсулина из опухоли β-клеток поджелудочной железы крысы и с помощью обратной транскриптазы получили рДНК Полученную рДНК встроили в плазмиду pBR322 Е. coli , в среднюю часть гена пенициллиназы . Рекомбинантная плазмида содержала информацию о структуре проинсулина .

Слайд 7

Синтез Белка Рекомбинантный белок синтезировался бактериями внутриклеточно в виде так называемых телец включения, которые представляют собой агрегаты целевого белка в денатурированном неактивном состоянии . Благодаря этому целевой белок, находясь в нерастворимом состоянии, не подвергается протеолизу цитоплазматическими ферментами.

Слайд 8

Процесс получения инсулина Процесс получения инсулина включал следующие стадии: 1. Ферментация (выращивание штамма-продуцента в ферментере); 2. Отделение биомассы (клеток продуцента) методом центрифугирования; 3. Разрушение клеток с выделением телец включения; 4. Очистка рекомбинантного белка

Слайд 9

Мировой рынок инсулина Производство и продажу инсулина впервые начала американская фирма Eli Lilly (США). Мировой рынок инсулина составляет в настоящее время более 400 млн. долларов, ежегодное потребление около 5000 кг.

Слайд 10

Спасибо за внимание!