Изучение микрофлоры полости рта

Муниципальное бюджетное общеобразовательное учреждение

средняя общеобразовательная школа имени Виктора Романовича Поликанова

р.п. Многовершинный Николаевского муниципального района

Хабаровского края

Изучение микрофлоры полости рта

Выполнила: Хофертс Дарья Владимировна, ученица 8 класса

Научный руководитель: Балхарова Ирина Жаповна, учитель биологии и химии

                                р.п. Многовершинный, 2022 год

Содержание:

Введение

Теоретическая часть

Глава 1. Нормальная микрофлора организма человека. О микробах и заселяемых ими областях

Глава 2. Микрофлора полости рта

1.  Нормальная микрофлора полости рта
2. Микробная флора полости рта некоторых патологических процессах.

Практическая часть

Заключение

Литература

Приложения

Введение.

              На земле нет ни одного места, где бы ни встречались сотни различных видов микроорганизмов, которые имеют огромное значение, являясь возбудителями разнообразных превращений минеральных и органических веществ, а также заболеваний человека, животных и растений. Подавляющее большинство микроорганизмов не наносит хозяину видимого вреда. Изучение видового состава, определение роли микробного биоценоза в различных метаболических процессах в организме человека становится интересной,  особенно актуальной в наши дни.

               Наиболее активно бактерии обживаются в желудочно-кишечном тракте, при этом колонизация осуществляется четко «по этажам». Во рту каждого из нас постоянно живет огромное количество микроорганизмов, так как там всегда тепло, влажно, имеются питательные вещества. Поэтому изучение микробной флоры полости рта вызывает повышенный интерес в данном исследовании.  Незнание этой информации дает серьезные основания для подозрений на наличие того или иного инфекционного процесса. В этом заключается проблема исследования.

Цель исследования - изучение микрофлоры полости рта.

 Задачи:

• изучение литературы по теме;
•  отбор и подготовка проб для анализа;
• исследование микрофлоры полости рта;
• выявление микроорганизмов, часто выделяемых из организма здорового и больного человека;
• анализ микрофлоры полости рта.

Объект исследования - нормальная и патогенная микрофлора полости рта.

Предмет исследования – микрофлора полости рта.

Методы исследования:

• наблюдение;
• лабораторный метод;
• анализ;
• сравнение

Новизна исследования: работа достаточно нова, актуальна, интересна, тема работы затрагивается глазами подростка.

Достоверность исследования: подтверждается характером наблюдения, методами исследования и данными санитарно-бактериологической лаборатории.

Практическая значимость исследования: данная работа может быть использована широким кругом читателей, учителями и учащимися в средней школе, студентами, медицинскими работниками, работниками ГСЭН, пищеблока и т.д. Проблема здоровья человека – предмет особой заботы государства.

Глава 1. Нормальная микрофлора организма человека.

1. О микробах и заселяемых ими областях.

               Микрофлора полости рта - совокупность представителей различных таксономических групп микроорганизмов, населяющих полость рта как своеобразную экологическую нишу организма человека, вступающих в биохимические, иммунологические и прочие взаимодействия с макроорганизмом и друг с другом.

              Микрофлору полости рта подразделяют на постоянную и непостоянную. Видовой состав постоянной микрофлоры полости рта в норме довольно стабилен и включает представителей различных микроорганизмов (бактерии, грибки, простейшие, вирусы и др.). Преобладают бактерии анаэробного типа дыхания - стрептококк, молочнокислые бактерии (лактобациллы), бактероиды, фузобактерии, порфиромонады, превотеллы, вейллонеллы, а также актиномицеты.

       В условиях физиологической нормы организм человека содержит сотни различных видов микроорганизмов, среди них доминируют бактерии, тогда как вирусы и простейшие представлены значительно меньшим числом видов. Подавляющее большинство таких микроорганизмов - сапрофиты - комменсалы, они не наносят хозяину видимого вреда. Видовой состав микробного биоценоза различных отделов организма периодически меняется, но каждому индивидууму свойственны более или менее характерные микробные сообщества (как говорили римляне, каждому - своё). По Ж.Б. Ламарку основными условиями выживания вида являются нормальная жизнедеятельность, быстрое воспроизведение плодовитого потомства. Сам термин «нормальная микрофлора» объединяет микроорганизмы, выделяемые из организма здорового человека. Сложившееся за десятилетия положение относительно нормальной микрофлоры не абсолютно; например, менингококки и пневмококки выделяют из носоглотки 10% здоровых лиц, для остальных 90% они представляют серьезную опасность. Попадание патогена в организм, в орган, тропный его вирулентным потенциям, далеко не всегда приводит к развитию болезни.

     Основные отделы организма, заселяемые бактериями, включают желудочно-кишечный тракт, ротовая полость, воздухоносные пути, в этих местах бактерии живут и размножаются. Независимо от вирулентных свойств бактерии подвергаются воздействию защитных факторов.

 В ротовой полости на микроорганизмы действует слюна, содержащая набор антимикробных веществ, а также смывающая бактерии.  Во рту всегда найдутся укромные уголки, обживаемые бактериями (десневые карманы, щели между зубами). В состав микрофлоры ротовой полости входят разнообразные микроорганизмы; часть из них образует аутохтонную (специфические для данного биотопа виды) микрофлору, другие - аллохтонные (микробы из других биотопов хозяина - носоглотки, иногда кишечника), а также из окружающей среды (заносная микробиота). Среди бактерий доминируют стрептококки, составляющие 30-60% всей микрофлоры ротоглотки. Более того, они выработали определенную «географическую специализацию», например стрептококк метеор тропен к эпителию щек, стрептококк Саливариус - к сосочкам языка. Помимо перечисленных видов, в ротовой полости обитают спирохеты родов Лептоспира, Боррелия бор и трепонема и разнообразные простейшие, это  Entamoeba- Энтамёба буккалис, Энтамёба денталис. Первоначальная  микрофлора представлена лактобациллами, энтеробактериями, стафилококками, коринебактериями.

Нормальная микрофлора играет важную роль в защите организма от патогенных микробов, но и  нормальная микрофлора способна вызывать развитие инфекционных заболеваний, большая часть которых носит оппортунистический характер. Кишечные анаэробы вызывают формирование абсцессов после проникновения в кишечную стенку в результате травм, а основными возбудителями пневмоний считают микроорганизмы, обитающие в носоглотке. Отсутствие четкого разграничения между условным патогеном и комменсалом дает основание полагать, что неограниченная колонизация организма любым видом бактерий, способным выживать в организме человека, может приводить к развитию патологии. У лиц с иммунодефицитами слабовирулентные или авирулентные микроорганизмы (кандиды, пневмоцисты) могут вызывать тяжелые фатальные поражения.

Нормальная микрофлора составляет конкуренцию для патогенов, и механизмы подавления их роста достаточно разнообразны. Основным является избирательное связывание поверхностных рецепторов клеток. Большинство представителей резидентной микрофлоры проявляет выраженный антагонизм, направленный против патогенных видов (у бифидобактерий, лактобацилл).

Не менее важна роль нормальной микрофлоры как антигенного стимулятора именной системы; отсутствие нормального микробного биоценоза вызывает многочисленные ее дисфункции. При нормальной колонизации многочисленные микробы индуцируют образование низких титров АТ, мишенью которых вряд ли являются конкретные виды.

Трудно переоценить роль нормальной кишечной микрофлоры в различных метаболических процессах и поддержании их баланса. Например, метаболизм некоторых веществ включает экскрецию их из печени в просвет кишечника с последующим возвратом в нее. В большинстве эти  продукты экскретируются в форме глюкуронидов или сульфатов, не способных к обратному всасыванию в подобной форме. Их всасывание обусловливают кишечные бактерии. Кишечные бактерии принимают участие в инактивации токсичных продуктов, проникающих извне и образующих эндогенно. Кислоты, газы, выделяющихся в ходе их жизнедеятельности, оказывают благоприятное действие на перистальтику, топографию кишечника и своевременное его опорожнение.

Глава 2. Микрофлора полости рта.

2.1. Нормальная микрофлора полости рта.

Возникновение, степень тяжести, а также интенсивность развития  воспалительно-деструктивных заболеваний пародонта напрямую зависят от качественного и количественного состава микрофлоры полости рта. Полость рта, ее слизистая оболочка и лимфоидный аппарат челюстно-лицевой области играют уникальную роль во взаимодействии организма человека с окружающим его миром микробов. Микробы участвуют в переваривании пищи в полости рта, в синтезе витаминов, оказывают большое позитивное воздействие на иммунную систему человека, являются мощными антагонистами патогенной флоры. Они продуцируют кислоты, которые оказывают разрушающее действие на твердые ткани зуба и являются одним из этиологических факторов кариеса, способствуют накоплению в зубной бляшке иммуносупрессоров, способны к инвазии, с последующим развитием воспалительных заболеваний. Доминирующее место как по разнообразию обитающей в полости рта видов, так и по количеству занимают бактерии. Количество бактерий в полости рта по числу видов и по содержанию в единице материала конкурирует с желудочно-кишечным трактом. Содержание микроорганизмов в слюне составляет от 4млн. до 5 млрд. в мл; в зубном налете – от 10 до 1000 млрд. в грамме.

Если разделить полость рта на несколько биотопов, то перед нами предстает следующая картина:

1 биотоп: на слизистой полости рта имеется грамнегативная анаэробная и факультативно-анаэробная флора, а также встречаются стрептококки. В подъязычной области, в складках и криптах преобладают облигатно-анаэробные виды. На слизистой твердого и мягкого неба встречаются стрептококки, нейссерии, коринебактерии.

В качестве второго биотопа имеет смысл выделить десневой желобок с находящейся в нем десневой жидкостью. Здесь преобладают нитевидные и извитые облигатно-анаэробные виды бактерий. Также обитают бактериоды, порфромонады, дрожжеподобные грибы, простейшие.

3 биотоп: с помощью ротовой полости происходит взаимосвязь между собой, так и со стороны макроорганизмов. В ротовой жидкости содержатся вейлонеллы, стрептококки Саливариус, аэрококки и микоплазмы.

4 биотоп: это зубная бляшка, которая является скоплением микробов, населяющих полость рта. Образование зубной бляшки начинается с присоединением монослоя бактерий к пелликуле или поверхности зуба. Зубная бляшка, пропитываясь солями кальция, превращает в зубной камень. На четвертые сутки при низкой гигиене полости рта в подлежащих тканях начинается воспалительная реакция. Некоторые авторы считают, что процесс деструкции пародонта может быть приостановлен и даже получить обратное развитие, если два раза в месяц удалять зубную бляшку. При исследовании относительного соотношения микробов в поддесневых участках здорового и пораженного пародонта выяснилось, что в здоровых участках преобладает кокки, прямые палочки, филоменты. В участках же с пораженным пародонтом увеличивается количество подвижных палочек и спирохет, которое прямо пропорционально возрастанию индекса бляшки, пародонтального индекса и глубины кармана. В микробной колонизации полости рта большую роль играет антагонизм бактерий. Например, гемолитический стрептококк вырабатывает пептид, а стрептококк митис - вещество небелковой природы, которые in vitro ингибируют черно-пигментные бактериоиды.

2.2. Микробная флора полости рта некоторых патологических процессах.

     Микробам отводится роль в патогенезе ряда болезней. Для заболеваний, вызванных симбиотической флорой, характерным является следующее:

• Инфекция обусловлена микроорганизмами, присутствующими в полости рта;
• Процесс обусловлен действием различных бактерий;
• Болезнь сопровождается изменением в составе всей симбиотической флоры полости рта.

    В полости рта встречаются заболевания, вызванные определенными бактериями (актиномикоз, сифилис). При болезнях полости рта, вызванных неспецифическими возбудителями, микробиологическим методом пользуется лишь в отдельных случаях.

   Микрофлора при кариесе зубов. Одной из актуальных проблем в стоматологии является кариес зубов. Однако это заболевание полностью еще не изучено.  В 1884 была предложена «кислотная теория кариеса» Мюллера, в которой говорилось, что причиной кариеса является декальцинация эмали, вызванная лактобактериями и стрептококками. Кариес рассматривается как инфекционный процесс, при котором эмаль и дентин разрушаются продуктами жизнедеятельности бактерий, входящих в состав флоры полости рта. Но эта теория не может объяснить происхождение кариозного процесса. Начались поиски микробного возбудителя кариеса. Представление о преобладающей роли при кариесе всего рода лактобактерий утвердилось недолго. Большинство исследователей утверждало, что кариес – это эндогенная инфекция и возникает из-за появления в эмали различных бактерий. В настоящее время известно, что при следующих условиях может развиваться кариес:

• Наличие достаточного количества углеводов в пище;
• Наличие микроорганизмов в полости рта;
• Контакт углеводов и микроорганизмов с зубами.

В настоящее время имеются доказательства того, что без контакта зубов с углеводами кариес не возникает. И.А. Бегельман (1960) при введении кариесогенной диеты в желудок через флисту не наблюдал в опытах на животных кариозного процесса. Доказательство роли микроорганизмов в возникновении кариеса следует считать исследования по выращиванию извлеченных из матки крысят.

1 группа крыс находилась на кариесогенной диете, 2 группа получала нормальный пищевой рацион. В 3 группе у нестерильных крыс развивались кариозные поражения, а у стерильных - нет. Вскоре у крыс 1 группы появились кариозные поражения, а у крыс 2 группы зубы остались интактными.

      Эти опыты показывают, что микроорганизмы не в состоянии вызывать кариес. На возникновение кариеса оказывает влияние структура твердых тканей и общее состояние организма. Играет роль и зубной налет в возникновении процесса деминерализации на ограниченном участке эмали. Зубной налет состоит из микробов, 70% которых - стрептококки. Изучение микробной флоры при кариесе дало возможность установить последовательность проникновения различных микроорганизмов в ткани кариозного зуба, а также выявить сдвиги в составе микробной флоры полости рта при кариесе. В протеолитическую группу входят бактероиды и пептострептококки, вырабатывающие ферменты, которые расщепляют органические вещества кариозного зуба. К кислотообразующей группе относятся стрептококки, лактобактерии, актиномицеты и энтерококки. По мере прогрессирования кариеса микробная флора зуба становится обильной и разнообразной. В кариозной полости присутствуют представители постоянной флоры полости рта, главным образом, анаэробы. Определив количество молочнокислых палочек в слюне, можно судить об активности кариеса у человека.

2.3. Практическая часть исследования.

    В целях изучения микрофлоры полости рта, нами были проведены следующие исследования:

    Микрофлора полости рта представлена стабильной группой аэробных и анаэробных микроорганизмов. Основные ее представители - а-стрептококки, энтерококки, стафилококки, лактобациллы, различные виды Кандида и т.д. Определенные  колебания  в микробных ценозах опосредствованы гигиеническими привычками, состоянием зубов. Полость рта населена обильной и разнообразной микрофлорой, которая попадает в нее из окружающей среды с воздухом, водой, пылью и продуктами питания. На состав и характер микрофлоры влияют характер питания, а также местные факторы. Полагают, что человек приспособлен к постоянной микрофлоре полости рта, имеет защитные механизмы и невосприимчив к ней. С другой стороны, микрофлора приспособлена к условиям полости рта. Основные патогенны - фузобактерии, превотеллы, стафилококки, стрептококки и т.д. Материалом в нашем исследовании является гной из патологического зубодесневого кармана, взятого у трех человек.            

       Исследуемые были подобраны стоматологом с разных возрастных категорий с такими заболеваниями, как пародонтит, гингивит. Только один из них был здоров. Материал для бактериологических исследований мы отбирали в стоматологической клинике стерильным ватным тампоном. В лаборатории посев производился на 2 плотные питательные среды: 5% кровяной агар и желточно-солевой агар. Этот материал помещался на 20 часов в термостат при t=37С. Для получения колоний материал, нанесенный на поверхность питательной среды, в количестве 1 капли втираем шпателем последовательно в чашки Петри так, чтобы он распределился равномерно тонким слоем по поверхности среды. Из гноя, оставшегося от посева, приготовили 3 мазка для окраски по Грамму и микроскопировали их. В результате исследования обнаружился рост бактерий, образовались радужные венчики на желточно-солевом агаре. После окрашивания по Грамму обнаружилось большое количество стафилококков вида Аурелиус, а также стрептококков, бактероидов, спирохетов.  Стафилококки видны в виде грамположительно окрашенных кокков красного цвета, располагающихся скоплениями, цепочками в виде гроздей винограда.

     1-й человек. Стафилококк непатогенный, гемолиз отрицательный, лицитовидная активность «+».

     2-й человек. Стафилококк патогенный, вид  Аурелиус, гемолиз положительный, лицитовидная активность «-».

     3-й человек. Стафилококк патогенный, вид  Аурелиус,  гемолиз положительный, лицитовидная активность «-».

     На 5% кровяном агаре на 2-3 мазке (2-го, 3-го человека) видно, что гемолиз положительный, а на 1 мазке (у 1-го человека) - гемолиз отрицательный. На желточно-солевом агаре лицитовидная активность положительная.

      В целях изучения микробной флоры, обитающей в различных органах организма человека, и сравнения с микробной флорой полости рта проведено микробиологическое исследование различных материалов: мокроты, мочи, крови. Анализ микробиологических исследований выглядит так: исследованы 5 человек с различными болезнями. Изучение микробной флоры происходило в бактериологической лаборатории, а результаты использовались готовые дермато-венерологической больницы и терапевтического отделения  больницы. Наименования исследований различные: посев на чувствительность к антибиотикам и микрофлору, посев на стерильность. В итоге выделили грубые «+» палочки, посевы мочи были стерильны. Некоторые посевы вообще роста не дали.

       Микрофлора достаточно скудная, в проксимальной части пищевода можно обнаружить бактерии, типичные для микрофлоры полости рта и глотки, в дистальных отделах можно выделить стафилококки, молочно-кислые бактерии, кандиды. В желудке бактериипрактически отсутствуют, либо их число не превышает / мл.содержимого, что обусловлено действием соляной кислоты.

Заключение.

    Организм человека содержит множество различных видов микроорганизмов, среди которых преобладают бактерии. Каждому индивидууму свойственны характерные микробные сообщества.         Изучение микробной флоры ротовой полости дало возможность установить последовательность проникновения различных микроорганизмов.

В результате проведенных в данной работе исследований были сделаны следующие выводы:

1. По мере прогрессирования болезни микробная флора становится обильной и разнообразной.
2. В микробной флоре организма присутствуют представители постоянной флоры полости рта, главным образом анаэробы, среди которых преобладают вид стрептококк изменчивый.
3. Наиболее активно бактерии обживают желудочно-кишечный тракт; при этом колонизация осуществляется четко «по этажам».
4. Источником микробов в младенческом возрасте является мать ребенка.
5. Микрофлора полости рта приспособлена к условиям полости рта.
6. Человек приспособлен к постоянной микрофлоре полости рта.

      В перспективе это исследование будет развиваться в сторону изучения, анализа микробных сообществ в органах желудочно-кишечного тракта. Рекомендации, которые мы можем дать вам, заключается в том, что надо соблюдать личную гигиену, посещать стоматолога 2 раза в месяц, в меньших количествах употреблять в пищу сладости, так как они влияют на появление кариеса, что неблагоприятно для здоровья!

Литература.

1. Анализ микрофлоры ротовой полости (natural- sciences.ru)
2. Баранникова И.А. «Что должен знать каждый о сохранении зубов». Медицина, г. Москва.
3. Галлера П.К. «Руководство по бактериологии». Издание третье, г. Саратов, 2004.
4. dep_medeiib.pnzgu.ru
5. Калина Г.П., Чистовича Г.Н. «Санитарная микробиология». Медицина, г. Москва, 1969.
6. Кулырова А.В. «Общая микробиология». Учебное пособие  №4, г. Улан-Удэ, 2002.
7. Лабинская А.С. «Микробиология с техникой микробиологических исследований». Медицина, г. Москва, 1978.
8.  Мишустин Е.Н., Емцев В.Т. «Микробиология». Издание третье, г. Москва, 1987.
9.  Петровская В.Г., Марко О.П. «Микрофлора человека в норме и в патологии». Медицина, г. Москва, 1976.
10.  Тимаков В.Д. «Микробиология». Медицина, г. Москва, 1978.
11.  Ушаков Р.В., Царев В.Н. «Стоматология для всех»
12.  Микрофлора полости рта: норма и патология, Нижний Новгород
13.  Статья из журнала «Наука и жизнь».
14.  Общая медицинская микробиология.
15.  Материалы сети Internet